Para se obter os fitólitos limpos e transparentes,
liberando-os dos tecidos vegetais foi usada uma metodologia proposta
anteriormente por Medeanic et al.
(2008), que inclui o tratamento químico das plantas amostradas por ácido
nítrico para a completa oxidação de toda a matéria orgânica.
A metodologia proposta inclui os
seguintes procedimentos: em torno de 3g de planta seca a temperatura ambiente e
fragmentada mecanicamente em pedaços de 0,5 cm é colocada em erlenmeyers de 250 ml. Adiciona-se a
esta mistura composta de ácido nítrico e de ácido sulfúrico concentrados, em
proporções de 1:4. O recipiente deverá ser coberto com um vidro de relógio.
Após, as amostras são aquecidas em um chapa quente durante três horas, a
temperatura de 90ºC. Após o resfriamento adiciona-se 10ml de peróxido de
hidrogênio (30%) em cada amostra e espera-se que a espuma desça. Após o
tratamento, as amostras se tornam de cor clara ou levemente amarelada. A
lavagem das amostras para a eliminação dos reagentes químicos e feita com água
destilada e com o uso de centrifuga durante 10 min em 3000 rpm. O precipitado é
lavado com água destilada por varias vezes até chegar a um pH neutro.
Fonte: Medeanic et al (2009)
Nenhum comentário:
Postar um comentário